ELISA試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。
ELISA試劑盒樣本的處理方式:
1、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?
2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,胃液、唾液一般采集時間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
3、采集血清時,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?
4、采集血漿時一般不加抗凝劑,采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆?
5、不貼壁細(xì)胞(分泌性蛋白),將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml離心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作為標(biāo)本進(jìn)行檢測,如有需要可進(jìn)行透析或純化處理。
ELISA試劑盒使用注意事項:
1、實(shí)驗(yàn)開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使檢測結(jié)果更為穩(wěn)定。
2、ELISA試劑盒檢測前,檢查各種儀器,打開酶標(biāo)儀,穩(wěn)定20分鐘左右。
3、檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結(jié)果。
4、底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
5、盡量做雙標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn),這樣可以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
6、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,要使底物避光保存,酶標(biāo)板均可拆卸,多余的部分應(yīng)密封好,低溫保存。